貨號 | 產品名稱 | 英文名稱 | CAS號 | 產品特征 |
Js10129-1ku | T4 DNA連接酶 | T4 DNA Ligase | 9015-85-4 | BR |
Js10128-1000u | T4 RNA連接酶 | T4 RNA Ligase |
| BR,10u/ul |
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T4 DNA連接酶—BR
英文名: T4 DNA Ligase
別名:
CAS號: 9015-85-4
MDL: MFCD00163508
T4 DNA連接酶常用于催化雙鏈DNA平末端或互補粘性末端之間的連接反應,也能催化雙鏈RNA 5´ -磷酸末端和3´ -羥基末端間的連接。還可以修復雙鏈DNA、RNA或DNA/RNA雜交雙鏈中的單鏈切口。以上反應均需消耗ATP。 隨酶附帶10×T4 DNA Ligation Buffer及*配方的2×Quick Ligation Buffer提供給您更多的選擇:而使用10×T4 DNA Ligation Buffer,16℃過夜連接可獲得最高的連接效率;使用快連Buffer在室 溫(25℃)下,僅需5分鐘即可完成粘性末端或平滑末端DNA的片段的連接反應。
使用建議:粘末端的連接反應:插入片段和載體的摩爾濃度比特別重要,此比例在2-6之間為好,低于2:1就會導致較低的連接效率,高于6:1則會導致多個插入。摩爾比請按載體與插入片段DNA濃度及分子大小來計算。
平滑末端的連接反應:平滑末端的連接反應與突出末端相比反應較慢(其Km值約為突出末端的100倍)。進行平滑末端的連接反應時,可提高DNA濃度,將使用酶量增加到突出末端量的2~5倍左右。 向粘粒或噬菌體進行連接反應:可使載體和插入DNA的摩爾比調整為1:1,同時增大DNA濃度以便取得良好效果。(0.05~0.1μg/μl以上)
反應溫度: 該酶的最適溫度為37℃,由于熱穩定性較差,因此 長時間反應時通常需在16℃下進行。若反應1-2小時左右的話也可在室溫下進行反應。
抑制劑:T4 DNA連接酶要求Mg2+,因此螯合Mg2+的EDTA的存在會阻礙反應。將溶解于含有高濃度EDTA緩沖液中的DNA準備作為樣品使用 ,先用滅菌蒸餾水或TE緩沖液進行置換。
儲存條件: -20℃
用途: DNA的片段和載體DNA的連接
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